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17β-雌二醇对子宫内膜癌细胞磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号传导通路的激活作用

摘要

目的探讨17β-雌二醇(E2)对子宫内膜癌细胞系Ishikawa细胞磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI-3K/PKB)信号传导通路的激活作用以及PI-3K抑制剂对其的影响.方法应用免疫印迹杂交技术,检测一定浓度(1×10-6 mol/L)17β-E2 作用于Ishikawa细胞不同时间(分别为0、5、15、30、60、120 min)后和不同浓度(分别为0、1×10-10、1×10-8、1×10-6、1×10-4 mol/L)17β-E2作用Ishikawa细胞一定时间(30 min)后PKB的活化情况[以磷酸化PKB和总PKB比值(p-PKB/PKB)表示],以及用同法检测PI-3K抑制剂LY294002对17β-E2活化PKB的影响.结果 1×10-6 mol/L 17β-E2作用于Ishikawa细胞15 min时,PKB的活化水平(0.533±0.029)已明显高于对照(0.361±0.029,P<0.05),30 min时最明显(0.666±0.021,P<0.001),而且持续至少达120 min时;随着17β-E2浓度(分别为1×10-10、1×10-8、1×10-6、1×10-4 mol/L)的增加,PKB的活化水平逐渐增高,与对照比较, 差异有显著性(除1×10-10 mol/L外, P值分别为>0.05、<0.05、<0.05、<0.001).随着LY294002作用浓度 (分别为0.1、10、50、100 μmol/L) 的增加,17β-E2作用Ishikawa细胞后PKB的活化水平逐渐下降(分别为0.415±0.032、0.111±0.035、0、0),同对照(0.443±0.032)比较,差异有显著性(除0.1 μmol/L外, P值分别为>0.05、<0.05、<0.001、<0.001),50 μmol/L 的LY294002已完全阻断了17β-E2对Ishikawa细胞PKB的活化作用.结论 17β-E2可通过非转录效应,迅速激活Ishikawa细胞的PI-3K/PKB信号传导通路,LY294002可抑制17β-E2对此通路的激活.

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