间隙连接蛋白43的磷酸化调节在卵巢上皮性癌化疗耐药中的作用

摘要

目的通过检测卵巢上皮性癌（卵巢癌）间隙连接蛋白43（Cx43）、非磷酸化Cx43及蛋白激酶C（PKC）的表达,探讨Cx43的磷酸化调节在卵巢癌化疗耐药中的作用。方法采用免疫组化法检测29例化疗敏感（化疗敏感组）和28例化疗耐药（化疗耐药组）卵巢癌患者癌组织中以及PKC抑制剂——星孢菌素处理后的卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP细胞中Cx43、非磷酸化Cx43及PKC蛋白的表达,并采用三磷酸腺苷-生物荧光肿瘤药敏实验（ATP-TCA）检测SKOV3/DDP细胞对化疗药物的敏感性。结果（1）免疫组化法检测显示,化疗耐药组Cx43和非磷酸化Cx43蛋白的阳性表达率（分别为54%和14%）明显低于化疗敏感组（分别为83%和59%,P＜0.05）;化疗耐药组PKC蛋白的阳性表达率明显高于化疗敏感组（分别为64%和31%,P＜0.05）。卵巢癌组织中,PKC蛋白的阳性表达率与Cx43、非磷酸化Cx43蛋白的阳性表达率呈明显负相关关系（r=-0.626和-0.714,P＜0.05）。（2）免疫组化法检测显示,星孢菌素处理后SKOV3/DDP细胞中PKC蛋白的表达强度减弱,Cx43及非磷酸化Cx43蛋白的表达强度增强,随着星孢菌素处理时间的延长,Cx43蛋白的表达强度进一步增强。（3）ATP-TCA检测显示,体外培养的SKOV3/DDP细胞对紫杉醇和顺铂均耐药;紫杉醇和顺铂分别联合星孢菌素处理后细胞敏感度增加,其中联合低浓度（1×10（-8）mol/L）星孢菌素者为中度敏感,联合高浓度(1×10-7mol/L)星孢菌素者为高度敏感。结论PKC通过对Cx43的磷酸化作用导致Cx43蛋白的表达下降,降低卵巢癌对化疗药物的敏感性,这种效应可以被星孢菌素逆转。