钙释放通道放射配基分析法的建立

摘要

目的用心肌匀浆建立心肌肌浆网钙释放通道检测方法，并观察其在高血压中的变化。方法用３Ｈ标记兰尼定（ｒｙａｎｏｄｉｎｅ），探索在大鼠心肌匀浆中建立钙释放通道放射配基分析的最佳条件，并对自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）左室心肌钙释放通道进行饱和实验。结果①保温时间在０～６０分钟内，３Ｈｒｙａｎｏｄｉｎｅ与心肌钙释放通道结合量迅速增加，９０分钟达平衡；匀浆蛋白在０～４００μｇ，３Ｈｒｙａｎｏｄｉｎｅ结合量与蛋白质浓度呈直线关系；反应介质中游离钙浓度直接影响３Ｈｒｙａｎｏｄｉｎｅ的结合量。②ＳＨＲ及正常对照组（ＷＫＹ）标准饱和曲线及Ｓｃａｔｃｈａｒｄ作图显示，３Ｈｒｙａｎｏｄｉｎｅ的特异性结合高，呈单位点结合等特点，ＳＨＲ组最大结合量（Ｂｍａｘ）值明显高于ＷＫＹ组（Ｐ＜００１）。结论用３Ｈｒｙａｎｏｄｉｎｅ可在心肌匀浆中进行钙释放通道放射配基分析，且发现３ＨｒｙａｎｏｄｉｎｅＢｍａｘ升高与高血压左室肥厚密切相关。