泛素特异性蛋白酶25在颞叶癫痫大鼠颞叶皮质中表达变化的实验研究

摘要

目的 探讨海人酸点燃杏仁核大鼠颞叶癫痫模型颞叶皮质中泛素特异性蛋白酶25（USP25）的表达情况。方法 将52只SD雄性大鼠按随机数字表法分为癫痫模型组（共39只）和假手术对照组（简称对照组,13只）。癫痫模型组建立海人酸点燃杏仁核大鼠颞叶癫痫模型,再按构建成功的时间分为3组（构建成功1 d为急性期组、构建成功7 d为潜伏期组、构建成功30 d为慢性期组,每组各13只）,在观察结束时取材。对照组在杏仁核注入生理盐水,与癫痫模型组伴随取材。免疫组织化学染色及免疫荧光双标法检测USP25在颞叶皮质中的表达及与神经元（NeuN）和星形胶质细胞（GFAP）的共定位情况；实时荧光定量PCR法和蛋白免疫印迹法检测USP25在颞叶皮质中的表达变化。结果 在注药侧颞叶皮质中,癫痫模型组USP25与NeuN的共定位阳性细胞在癫痫后期增加,USP25 mRNA及蛋白水平在癫痫发作不同时期的表达差异均有统计学意义（F值分别为25.48、7.68,均P＆0.05）。与对照组（mRNA：1.00±0.36；蛋白：1.00±0.46）比较,潜伏期组（mRNA：10.80±4.82；蛋白：1.88±0.32）和慢性期组（mRNA：12.97±4.48；蛋白：1.92±0.26）的表达水平显著增加,差异均有统计学意义（均P＆0.05）。在未注药侧皮质中,USP25 mRNA及蛋白水平在癫痫发作不同时期的表达差异也均有统计学意义（F值分别为86.86、6.65,均P＆0.05）。结论 颞叶皮质中USP25的表达在癫痫大鼠潜伏期后增加,提示去泛素化通路参与颞叶癫痫的慢性病理过程。