胶质瘤干细胞对替莫唑胺敏感性的研究

摘要

目的探讨胶质瘤干细胞（GSC）对替莫唑胺（TMZ）的敏感性及耐药机制。方法新鲜多形性胶质母细胞瘤（GBM）标本培养后获得GSC。免疫荧光技术检测未分化GSC的CD133及分化生长GSC的CFAP的表达,MTS法检测对替莫唑胺的敏感性,流式细胞技术对CD133阳性细胞的比例进行定量,荧光标记的甲基化特异性PCR分析MGMT启动子区域的甲基化状态,Western blot。检测抑癌基因PTEN的表达。结果 （1）5例GBM标本中成功获得GSC,符合肿瘤干细胞定义。（2）5个GSC细胞株多数对TMZ不敏感。其中,T509的半数抑制浓度（IC50）为22.3μmol/L（敏感）,T411的IC50为286.3μmol/L（中度敏感）,其余3个细胞株T402,T405及T509的IC50皆大于1000μmol/L（不敏感）。（3）CD133阳性细胞比例大于10%的GSC细胞株对TMZ不敏感。（4）MGMT启动子区域呈去甲基化状态的GSC对TMZ不敏感或仅为中度敏感。（5）5个GSC细胞株中,PTEN表达水平差异大,与GSC对TMZ的敏感性无明显关联。结论 GSC对TMZ普遍耐药,与MGMT启动子区域甲基化状态及CD133阳性细胞有关,而与PTEN蛋白表达水平无明显关联。