组蛋白去乙酰化酶抑制剂apicidin对胶质瘤干细胞生物活性的影响

摘要

目的探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂apicidin介导的Nanog表达抑制对胶质瘤干细胞（GSCs）增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法人胶质瘤细胞系U87体外常规培养,应用无血清悬浮培养法获得GSCs,免疫荧光染色检测细胞CD133、巢蛋白（nestin）的表达进行鉴定;以0.5μmol/L apicidin处理GSCs 48 h作为实验组,以未经处理的GSCs作为空白对照组,RT-PCR和Western blotting分别检测2组细胞apicidin靶基因Nanog mRNA和蛋白的表达;免疫荧光双重染色检测GSCs中CD133和Nanog蛋白的表达;噻唑蓝（MTT）比色法检测0.2、0.5、1.0、2.0μg/mL apicidin对细胞增殖的抑制作用;Transwell实验检测apicidin对细胞迁移和侵袭能力的影响。结果由U87胶质瘤细胞系成功获得CD133、nestin表达阳性的GSCs;与空白对照组相比,实验组细胞中Nanog mRNA和蛋白的表达显著减少,Nanog+、CD133+以及Nanog+/CD133+细胞阳性率均显著降低,细胞的迁移[迁移细胞数:（87.50±4.65）个/视野vs（128.50±6.14）个/视野]和侵袭能力[穿膜细胞数:（55.75±4.79）个/视野vs（81.50±5.45）个/视野)]下降,差异有统计学意义（P＜0.05）;MTT比色法显示不同浓度apicidin组GSCs细胞的吸光度（A）值较空白对照组降低,抑制率增加,而且apicidin浓度越高,GSCs细胞的A值越低,抑制率越高,比较差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论组蛋白去乙酰化酶抑制剂apicidin可抑制靶基因Nanog mRNA和蛋白水平表达,从而抑制GSCs的细胞增殖、迁移和侵袭能力。