限制性差异显示RT-PCR技术对大鼠脑缺血相关基因表达的研究

摘要

目的研究大鼠急性局灶性脑缺血时缺血与非缺血组织中基因表达的差异,以及差异表达基因随时间变化的规律,为临床寻找新的防治脑缺血的靶点奠定基础.方法采用线栓法制备大鼠不同时间脑缺血动物模型,采用限制性差异显示RT-PCR技术(restriction display RT-PCR,RD-RTPCR),研究在大鼠局灶性脑缺血过程中差异基因的表达.结果在缺血后各时间点分别出现上调的EST片段有32条、下调的有13条.其中7条在缺血0.5、1.0、4.0小时均出现变化,分别系同一对引物所扩增且分子量相同,其在脑缺血中的表达具有一定的规律性.结论利用RD RT-PCR技术成功获取了大鼠脑缺血过程中差异表达的基因,并揭示了部分基因在脑缺血过程中呈现的规律性变化,为进一步筛选、鉴定与克隆表达这些与脑缺血密切相关的基因,阐明脑缺血发病机制奠定基础.