不同途径导入rAAV-VEGF165基因对大鼠缺血性脑保护的比较研究

摘要

目的 比较不同途径(直接注射、脑脊液及静脉内)导入重组腺相关病毒介导的血管内皮细胞生长因子基因(recombinant adeno-associated virus mediated vascular endothelial growth factor165 gene,rAAV-VEGF165)治疗大鼠局灶性脑缺血的疗效,寻找出适合临床、安全、有效的基因导入方法.方法 用线栓加环扎法建立SD大鼠大脑中动脉持续性闭塞(MCAO)模型.30只雄性SD大鼠随机分为直接注射组、脑脊液导入组、静脉导入组、MCAO组和假手术组,其中治疗组于术后24 h内将rAAV-VEGF165基因从大鼠脑缺血边缘区、小脑延髓池或股静脉内注入.术后14 d取脑,免疫组织化学染色检测脑缺血边缘区VEGF的表达和微血管的密度、HE染色观察脑组织坏死情况、4% TTC染色检测脑梗死体积.结果 与单纯梗死组和假手术组相比较,治疗组脑缺血边缘区VEGF表达水平明显升高、微血管密度显著增高(P＜0.01),脑组织坏死情况明显减轻,脑梗死体积明显缩小(P＜0.05);其中以前2个指标在直接注射和脑脊液导入组比静脉导入组更为显著(P＜0.05).结论 直接注射和脑脊液导入比静脉内导入rAAV-VEGF165基因转染到大鼠缺血脑组织的效果更优,而且通过脑脊液导入可能是较为合适有效的途径.