小鼠早期肾脏纤维化加重缺血再灌注诱导的急性肾损伤

摘要

目的研究小鼠早期肾脏纤维化病变对缺血再灌注（IR）诱导的急性肾损伤（AKI）的影响。方法 8～12周龄雄性C57BL/6小鼠被随机分为4组:（1）假手术（Sham）组（n=3）;（2）单侧输尿管结扎（UUO）组（n=6）:分为UUO术后3d组（UUO3d,n=3）和UUO术后5d组（UU05d,n=3）;（3）肾脏缺血再灌注（IR）组（n=7）,双侧肾脏缺血40 min再灌注24 h;（4）UU03d+IR组（n=6）:UUO术后2 d双侧肾脏缺血40 min再灌注24 h（实际UUO时间为3 d）。HE及Masson染色观察各组小鼠急、慢性肾组织病理改变;Western印迹及免疫组织化学法（IHC）检测凋亡级联蛋白caspase-3表达;IHC法检测细胞增殖标志蛋白ki67的表达。结果 HE及Masson染色结果显示,UUO组小鼠出现随时间延长而加重的肾脏慢性病变,UU03d组和UU05d组小鼠肾间质基质纤维沉积面积明显高于Sham组,UU05d组基质纤维沉积面积明显大于UU03d组（均P＜0.05）。UU03d+IR组小鼠肾脏间质出现大量炎性细胞浸润、管腔扩张、刷状缘消失、小管上皮细胞空泡变性、坏死脱落等急性小管损伤,同时合并肾小管萎缩、间质蓝染基质（纤维）增多等慢性损伤;急性小管损伤评分较IR组明显增加（P＜0.05）。UU03d+IR组血肌酐水平较Sham组明显增高（P＜0.05）。免疫组化结果显示,相对于IR组UU03d+IR组肾小管caspase-3表达明显增加,ki67阳性表达的肾小管细胞占比明显减少（均P＜0.05）。结论早期肾脏纤维化病变加重IR诱导的AKI,增加肾小管上皮细胞凋亡,减少肾小管上皮细胞损伤后的增殖修复。