N-乙酰半胱氨酸对慢性环孢素A肾毒性的保护作用

摘要

目的探讨N-乙酰半胱氨酸（NAC）对慢性环孢素A（CsA）肾毒性保护作用的分子机制。方法 ICR小鼠随机分为4组:（1）对照组:皮下注射橄榄油(1 ml·kg-1·d-1)4周;（2） NAC对照组:皮下注射橄榄油(1 ml·kg-1·d-1)和NAC(150 mg·kg-1·d-1,1 g/L溶于饮用水中);（3）模型组:低盐饲料喂食下皮下注射CsA(30 mg·kg-1·d-1)4周建立慢性CsA肾毒性小鼠模型;（4）治疗组:低盐饲料喂食下同时给予CsA(30 mg·kg-1·d-1皮下注射)和NAC(150mg·kg-1·d-1饮用水中)4周。检测各组小鼠的体质量、肾功能;Masson染色观察肾小管间质纤维化;酶联免疫吸附法测定尿8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）;免疫组化和Western印迹法分别检测抗衰老基因Klotho及其下游信号通路AKT-FoxO1的蛋白表达。结果与对照组相比,模型组小鼠肾功能下降[Scr（27.8±1.2）μmol/L比（19.0±2.2）μmol/L,P＜0.01];肾小管间质带状纤维化;尿8-OHdG的排泄增加[（41.2±16.8）ng/d比（28.7±7.4）ng/d,P＜0.05];Klotho蛋白表达减少[（17.8±4.5）%比（100.0±4.0）%,P＜0.01]。与模型组比较,治疗组上述指标明显好转（均P＜0.05）。直线相关分析示,Klotho蛋白的表达与尿8-OHdG水平（r=-0.934,P＜0.01）和AKT-Fox01蛋白免疫活性（AKT:r=-0.939;Fox01:r=-0.919,均P＜0.01）均呈负相关。结论 NAC对慢性环孢素A肾毒性具有保护作用,这种作用可能与上调Klotho基因表达、抑制AKT-Fox01信号通路有关。