甲状旁腺激素通过介导Wnt信号通路诱导人近曲小管上皮细胞转分化

摘要

目的观察甲状旁腺激素（PTH）对人肾小管上皮细胞（HK-2）间充质转分化的影响,探讨Wnt信号通路在其中的作用。方法细胞被分为对照组和PTH处理组。实时定量-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western印迹法检测α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）及钙黏素E（E-cadherin）mRNA及蛋白的表达;10-10mol/L PTH作用细胞48 h后,采用实时定量PCR芯片技术检测Wnt通路相关基因表达。不同浓度PTH作用后和10-10mol/L PTH作用不同时间后,用RT-PCR、Western印迹法检测Wnt4 mRNA及蛋白的表达。构建Wnt4过表达及敲除Wnt4的细胞模型,用RT-PCR、Western印迹法检测α-SMA、E-cadherin、Wnt4 mRNA及蛋白质表达。结果与PTH处理组相比,PTH+DKK1组仅α-SMA mRNA和蛋白表达量明显降低;E-cadherin mRNA及蛋白表达量明显升高（均P＜0.01）。PTH处理组细胞有18个Wnt信号通路基因显著上调和9个基因下调;与对照组相比,PTH处理组细胞Wnt4 mRNA和蛋白表达量明显增加（均P＜0.01）;与PTH处理组相比,PTH+Wnt4过表达组α-SMA mRNA和蛋白表达量明显上调,E-cadherin mRNA和蛋白表达量明显下调（均P＜0.05）。与PTH处理组相比,PTH+Wnt4 siRNA组α-SMA mRNA和蛋白表达量降低,E-cadherin mRNA和蛋白相对表达量升高（均P＜0.05）。结论甲状旁腺激素诱导HK-2细胞间充质转分化。其机制可能与PTH激活Wnt信号通路,尤其Wnt4信号通路有关。