反相高效液相色谱法同时测定血清中维生素A,D3,E

摘要

目的建立RP-HPLC法测定血清中脂溶性维生素A,D3,E的含量.方法血清经甲醇沉淀蛋白后,以正己烷提取,经氮气吹干,甲醇定容后进样分析.色谱柱:Hypersil ODS 5μm,250×4.0mm;流动相:甲醇-异丙醇(95:5,v/v);流速:1mL/min;检测波长:维生素A 325nm,维生素D3265nm,维生素E 292nm;柱温:25℃.结果三种维生素的提取回收率均大于85%,方法回收率均大于90%;日内、日间相对标准偏差均小于7%.线性范围:维生素A 0.2～2.0μg/mL(r=0.9987),维生素D340～400ng/mL(r=0.9994),维生素E 4.0～30.0μg/mL(r=0.9988).结论本法操作快速、灵敏、简便易行.