EGCG通过调控DNA结合蛋白Ku70促进肺癌细胞凋亡

摘要

目的观察表没食子儿茶素没食子酸酯[（-）-epigallocatechin-3-gallate,EGCG]对人肺腺癌细胞株的凋亡诱导作用,探讨Ku70在EGCG促肺癌细胞凋亡中的作用机制。方法构建pSliencer 4.1-CMV-shKu70质粒干扰Ku70的表达,建立细胞系;MTT法和Annexin V/PI双染色流式细胞术检测细胞的增殖及凋亡;Western blot法检测Bax、caspase-3（17 kDa）、Ku70蛋白的表达;免疫共沉淀法检测Ku70和Bax之间的相互作用。结果 EGCG可明显抑制A549的增殖（P＜0.01）,并诱导其凋亡（P＜0.05）,上调Bax、caspase-3表达,下调Ku70表达。抑制Ku70的表达后,EGCG对A549细胞的抑制增殖和促进凋亡作用更加明显,进一步显著上调caspase-3的表达（P＜0.05）,但是Bax的表达无明显变化;同时EGCG可以减弱Ku70-Bax之间的相互作用（P＜0.05）。结论 EGCG可抑制人肺腺癌细胞增殖及诱导细胞凋亡,其机制与抑制Ku70的表达,抑制Ku70-Bax之间的相互作用,激活Bax,启动caspase级联反应有关。