miR-29c靶向FOS抑制心肌纤维化的分子机制研究

摘要

目的;分析miR-29c对小鼠心肌纤维化(M F)的影响及其作用机制.方法;小鼠心肌成纤维细胞经血管紧张素II(AngiotensinII,AngII)处理24h,命名为AngII组,取对数生长期的AngII组细胞,以脂质体法转染各种质粒,分别命名为AngII+miR-29c组(转染miR-29c mimics)、AngII+miR-con组(未转染细胞)、AngII+anti-con组(转染anti-con)、AngII+anti-miR-29c组(转染anti-miR-29c)、AngII+siFOS(转染siFOS)、AngII+si-con组(转染si-con)、AngII+miR-29c+Ctrl组(miR-29c mimics和pcDNA 3.1共转染)、AngII+miR-29c+FOS组(miR-29c mimics和pcDNA 3.1-FOS共转染),以常规培养不作任何处理的心肌成纤维细胞为空白对照组(空白组);运用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测心肌成纤维细胞中miR-29c的表达;Western blot检测各组细胞中FOS、人I型胶原蛋白(Col I)、人III型胶原蛋白(Col III)、人α平滑肌肌动蛋白(α-SM A)的蛋白表达;噻唑蓝(M T T)法检测各组细胞增殖;双荧光素酶报告基因实验检测各组细胞荧光活性.结果;与空白组相比,AngII组miR-29c表达显著降低(P<0.05);与AngII+miR-con组或AngII+si-con组相比,AngII+miR-29c组或AngII+siFOS组细胞活性和Col I、Col III、α-SMA蛋白表达均显著降低(P<0.05);FOS是miR-29c的靶基因.与AngII+miR-29c+Ctrl组相比,AngII+miR-29c+FOS组细胞活性和Col I、Col III、α-SMA蛋白表达均显著升高(P<0.05).结论;miR-29c可抑制小鼠心肌成纤维细胞增殖和纤维化,其机制可能与靶向FOS有关,或可为心肌纤维化的预防和治疗提供新靶点.