钠离子-牛磺胆酸共转运多肽在人骨髓间充质干细胞（BMSCs）中的表达及其对HBV体外感染BMSCs的影响

摘要

目的研究体外培养的人骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs）中钠离子-牛磺胆酸共转运多肽（sodium taurocholate cotransporting polypeptide, NTCP）的表达情况, 探索体外培养的BMSCs能否自然感染乙型肝炎病毒（hepatitis B virus, HBV）及NTCP是否是HBV感染BMSCs的一个功能性受体。方法将HBV阳性血清以不同方法感染BMSCs, 检测培养基上清及细胞中HBV DNA、培养基上清中乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）和乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）等感染指标。NTCP-siRNA转染BMSCs后, 再次用HBV阳性血清感染BMSCs, 检测各感染指标。Western blot法检测各处理组BMSCs中NTCP的表达情况。结果 HBV可自然感染体外贴壁培养的人BMSCs, 但感染效率很低。当HBV感染悬浮状态下的BMSCs时, 感染效率显著升高。BMSCs中存在NTCP的表达, 且HBV可显著上调NTCP的表达量, 特别是对悬浮状态下的BMSCs。当BMSCs中NTCP的表达被NTCP-siRNA沉默后, HBV对BMSCs的感染效率显著下降。结论体外培养的人BMSCs可被HBV自然感染, 且其细胞内表达的NTCP是其感染HBV的一个功能性受体。人BMSCs可作为一种易感、稳定、无需分子修饰的细胞模型, 用于研究HBV生命周期的早期阶段以及抗病毒治疗研究。