非磷脂脂质体介导反义c-myc基因质粒转染对人脑胶质瘤细胞U251的影响

摘要

目的确定非磷脂脂质体(non-phospholipid liposome, NPL)介导反义c-myc基因转染人脑胶质瘤(glioma)的作用. 方法以金属离子诱导表达人反义c-myc基因的质粒pHMTASCMH DNA与NPL结合转染人脑恶性胶质瘤细胞U251,转染6?h后加入200μmol/L ZnCl2作实验组,不加ZnCl2转染细胞和单用NPL为对照组.在实验的第24、48、72和96?h分别测定细胞还原四甲基偶氮唑盐(MTT)的光吸收值.将实验第24小时或72小时的细胞分别进行annexin-V-FLUOS或TUNEL染色;细胞裂解后做ELISA检测c-myc基因表达产物含量的变化. 结果显微镜下观察转染48?h实验组瘤细胞开始出现多角型细胞,细胞胞浆内产生空泡;MTT实验结果发现其细胞活性下降;annexin-V-FLUOS染色与TUNEL实验显示细胞出现明显的程序性细胞死亡特征;c-myc基因表达产物下降. 结论非磷脂脂质体介导反义c-myc基因转染脑胶质瘤细胞可特异性地抑制c-myc基因表达,抑制瘤细胞生长,细胞活性下降,乃至出现程序性细胞死亡.