耐核糖核酸酶内含HCV RNA病毒样颗粒的表达

摘要

目的构建可以表达耐核糖核酸酶(RNase)的内含HCV RNA病毒样颗粒的载体质粒. 方法将表达载体pI NCCL用HindⅢ酶切后,与用相同内切酶酶切的HCV RNA非编码区(5′-UTR)扩增产物,在T4 DNA连接酶的存在下连接,构建一新的表达载体pI NCCL-HCV RNA 5′-UTR,再转化BL21-DE3 E.coli进行原核表达. 结果成功构建得到了新的表达载体pI NCCL-HCV RNA 5′-UTR,经原核表达为耐RNase的内含HCV RNA病毒样颗粒. 结论得到的pI NCCL-HCV RNA 5′-UTR表达载体及原核表达系统,可作为一个耐RNase的HCV RNA标准品和质控品的构建和制备表达载体平台.