质控品

摘要： 随着我国经济水平的不断提升,我国人民的消费水平不断提高,人们对于美好生活的追求也越来越高。目前人们在生活中重点关注食品安全问题,食品检测方面尤其是微生物检测面临更高的挑战,需要结合当前问题,通过科学检测提前防控。本篇文章主要就食品微生物检测质控品的应用进行详细分析,并且提出了相关注意事项,希望为以后的食品微生物检验提供借鉴。

摘要： 目的:制备血红蛋白液粪便隐血阳性质控品,并评价其检测线性范围。方法:将自制的隐血质控品和临床样本,用手工法和FA160粪便分析仪分别测试,比较两种方法在检测线性范围、空白试验、准确性试验和重复性试验的差异。结果:人工法和仪器法一致性较好,2μg/mL的血红蛋白液可作为FA160粪便分析仪隐血的阳性质控品,4°C无防腐剂可作为其保存条件。结论:血红蛋白液隐血阳性质控品制备简单,在4°C保存性能稳定,与人工法比较有较好的一致性,可作为隐血的室内质控品。

摘要： 目的制备模拟临床血浆样本的表皮生长因子受体(EGFR)基因突变检测质控品,对其进行性能评估,作为日常检测中质量控制的保证。方法收集多份病理标本中EGFR基因19del、L858R、T790M主要位点突变的阳性标本,提取DNA后,用正常献血者的报废血浆调整DNA浓度,用PCR验证各突变位点的循环阈值(Ct),再混匀分装成每管0.5 mL,灭活,保存于-80°C。自制EGFR突变质控品复融后常规测定,抽取10支重复测定2次,进行均一性检测;连续1年每2个月各抽取1支重复检测,进行稳定性评估;并将自制质控品测定10次进行准确性评价。结果自制EGFR基因突变质控品有较好的均一性(P值>0.05);自制19del、L858R和T790M突变质控品保存第1、2、4、6、8、10、12个月检测的Ct值结果的变异系数分别为1.3%、1.8%和1.3%,均小于5%,检测结果的稳定性较好;自制质控品测定10次的阳性符合率为100%。结论制备的低浓度EGFR突变质控品能满足临床EGFR突变检测室内质控要求,可以作为日常EGFR突变检测质量控制的有效手段。

摘要： 国内外对因食品微生物导致的大规模食物中毒事件的报道层出不穷。食品微生物污染所带来的后果比其他类型的食品污染更为严重。当前对食品微生物的防控贯穿食品生产加工的全过程。质控品作为给被测参数赋值的标尺,在数据准确度方面起到了关键作用。文章通过阐述当前各种质控品制备程序以及关键步骤并结合在食品微生物检测中的实际应用,以供相关人员参考。

摘要： 目的构建半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(CysC)原核表达载体,用以快速获取低成本、高浓度、高纯度的CysC纯化蛋白,为制备应用于临床实验室检测的CysC标准物质和质控品奠定基础。方法用Codon Adaptation Tool将人的CysC编码序列优化为大肠杆菌偏好的密码子序列,再将合成的DNA片段克隆至pET-28a(+)原核表达载体。将重组CysC表达质粒转化至E.coli BL21感受态中,优化诱导表达条件、确定最优表达条件组合及有效表达序列,并用融合标签对重组蛋白进行纯化。结果成功构建重组CysC原核表达质粒,明确CysC表达序列,确定异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白表达浓度、诱导温度等条件,纯化的CysC蛋白可通过临床检测,且稀释倍数与检测浓度间呈现线性关系。结论成功构建重组CysC的高效原核表达系统,重组CysC蛋白纯度大、浓度高、生产周期短,有望为CysC标准物质和质控品的制备提供物质基础。

摘要： 目的验证自制D-二聚体临界值质控品的性能。方法收集剩余血浆标本,制备成浓度在参考值上限附近的混合质控品,分装后置-20°C冷冻保存待用。自制质控品与常规样本同时检测,测定其批内精密度。连续6个月检测其批间CV,评价稳定性。并与商购定值质控品进行精密度比较。结果自制D-二聚体临界值质控品(浓度约为0.573 mg/L)批内精密度为4.35%,在规范允许范围内;6个月间,每个月的批间CV在5.99%~7.84%,符合规范要求;每个月间比较、任何月与累计均值比较,差异均无统计学意义(P>0.05);与商购定值质控品比较,精密度指标基本达到要求。结论自制临界值D-二聚体质控品符合质控品基本要求,稳定性良好,可以应用于临床实验室。

摘要： 目的探索微柱凝胶法直接抗球蛋白试验用IgG型阳性质控品的制备方法。方法采用IgG型抗D试剂致敏O型Rh(D)抗原阳性红细胞的方法来制备阳性质控品。通过三组试验来评估制作阳性质控品时IgG型抗D试剂的最适加入量、最佳反应温度和最佳反应时间,然后对制作的阳性质控品进行连续60 d试验来监测其稳定性。结果在取自血站血辫的2 mL全血标本中,IgG型抗D试剂的最适加入量为125μL,最佳反应温度为室温,最佳反应时间为20 min。制备的阳性质控品在连续监测60 d内直接抗球蛋白试验结果稳定,为3+凝集强度。结论采用IgG型抗D试剂致敏来自血站血袋血辫中的O型Rh(D)抗原阳性红细胞的方法制备的直接抗球蛋白试验阳性质控品,结果稳定可靠,可以应用到日常直接抗球蛋白试验工作中。

摘要： 目的 探讨朗道血清质控品作为酶联免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测血清可溶性生长刺激表达基因2蛋白(soluble growth stimulation expressed gene 2 protein,sST2)室内质控物的可行性。方法 连续性倍比稀释试剂盒中的sST2标准品来确定标准值和空白。使用双抗体夹心ELISA法检测sST2浓度,结果用线性回归拟合,建立标准曲线并计算相关系数(r),确定线性范围。取朗道血清质控品中值Level 2和高值Level3进行纯水复溶,分别混合均匀后用无菌EP管分装,-20°C冷冻保存。参照中国合格评定国家认可委员会发布的《CNAS-GL03能力验证样品均匀性和稳定性评价指南》,首先进行均匀性验证,从分装的中值Level 2质控品中随机抽取10管,重复检测两次,用单因素方差分析比较两次测量值;然后进行稳定性验证,随机取中值Level 2质控品6管,每管重复检测两次,将所得均值作为初始均值,分别于第3,6,9和12个月随机抽取6管,同样方法获得均值并分别与初始均值进行t检验比较。高值Level 3评价方法与Level 2相同。结果 在3.125~200.0 ng/ml范围区间,按标准品sST2的结果建立标准曲线(r=0.99)。在均匀性检验中,中值Level 2和高值Level3中的F值分别为1.932,0.519,P值分别为0.181,0.481,差异均无统计学意义(均P>0.05)。在中值Level 2和高值Level 3中sST2的初始均值分别是20.03 ng/ml,22.01 ng/ml。在中值Level 2中,第3,6,9和12个月的均值分别与初始均值进行t检验(t=0.857,0.506,0.683,1.144;P=0.412,0.624,0.510,0.279),差异均无统计学意义(均P>0.05);同样在Level 3中,t值分别为0.260,0.639,0.660,1.372;P值分别为0.800,0.537,0.524,0.200,差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论 在朗道血清质控品中值Level 2和高值Level 3中,sST2的浓度均较低且均匀性和稳定性好,因此二者均可以作为sST2低值质控品。

摘要： 目的探索用大容量低速离心机和廉价无毒的化学试剂规模化纯化低密度脂蛋白(LDL)的方法。方法以人血清为原料,加聚乙二醇6000(PEG6000)沉淀LDL,加NaCl调节液体密度并离心,反复此过程,逐步改变PEG6000和NaCl的浓度和配比直至LDL沉淀在离心后漂浮在液体表面从而与其他蛋白质分离。结果得到的LDL经鉴定纯度>95%,得率>50%。结论LDL因含脂质,在沉淀的状态下密度也较低,被置于较高密度的溶液中经低速离心,脂蛋白沉淀会漂浮在溶液表面,从而与其他蛋白分离。这是一个全新的脂蛋白分离方法,具有操作简便,处理容量大,试剂易得价廉且安全,器材要求低,得率较高,适用于各种实验室和生物制品厂,为LDL的各种研究提供了一个便利条件。用该法制备的高值品可用于生化检验中血脂测定的方法学验证和纯化相关载脂蛋白的起始物。本方法将为LDL药物化研究后的成果推广应用提供技术储备。

摘要： 食品微生物检测关系到食品安全.调查显示,75％左右的食源性疾病都是由于微生物引起的,因此做好食品微生物检测工作是实现食品安全的一个重要途径.而质控品管理是检测过程当中的重要环节,对于微生物检测效果有着直接影响.在管理过程中,要将标准菌株、质控样品以及分子水平质控品这三者作为重点,并形成一套完善的管理系统,减少食源性疾病的发生,为人们的健康和安全提供保障.

摘要： 介绍了质控品概述、质控品的使用及质控规则、失控分析。配套质控品(内部质控品）由仪器厂家或试剂厂家为本厂仪器或试剂配套生产的质控品,一般只能用于配套的仪器和试剂,或试剂厂家在每盒试剂内配套的质控品(build in）,一般为酶标试剂和手工操作试剂盒,大部分为定性项目.第三方质控品(外部质控品）由不属于仪器厂家也不属于试剂厂家的第三方厂家生产,不专为某特定仪器或方法和试剂配套生产.

摘要： 目的：比较血清蛋白电泳自制质控品和Helena商品质控品的性能,探讨自制质控品在血清蛋白电泳室内质量控制中的应用。 方法：以美国Helena公司提供的SPIFE2000全自动快速电泳仪及分析系统分别进行Helena质控品和自制质控品批内精密度测定、二种质控品电泳凝胶板间差异性比较测定、自制质控品日间精密度测定和保存半年期自制质控品的测定。 结果：自制质控品与Helena质控品相关性好,电泳后各蛋白组分的批内CV％均小于5％；二种质控品在不同琼脂糖板间的对比测定各蛋白组分的CV％也均小于5％,具有较小的变异系数；自制质控品电泳后各蛋白组分的日间精密度除α1球蛋白7.37％、β球蛋白5.50％外,其余CV％均小于5％。 结论：自制质控品与Helena质控品具有良好的相关性,符合临床使用的要求,是良好的室内质量监测的质控品.

摘要： 因此室内质量控制设计是探索和研究的重要方向。室内质量控制设计主要包括质控品的选择，质控方法的选择，质控规则的选择，室内质控异常结果分析四个方面的内容。

摘要： 本发明提供一种糖化血红蛋白质控品的制备方法，包括以下步骤：采集非糖尿病患者的血液样本，进行离心处理、去浆，得到红细胞；向红细胞中加入红细胞保存液，制得红细胞样本；将红细胞样本缓慢加入到分层液，离心得到分层的红细胞，每一密度的细胞分离液中均分散有与其适配的红细胞；将分层的的红细胞分装于不同的试管内，向每一试管内加入生理盐水，得到红细胞悬浮液，调节所述红细胞悬浮液的血红蛋白浓度为120g/L，筛选出HbA1c值为3～5％的红细胞悬浮液，获得糖化血红蛋白质控品。本发明还提供一种质控品。本发明的制备方法能够批量生产低值糖化血红蛋白质控品。

摘要： 本发明提供一种抗原抗体稀释液，由作为溶剂的体积百分比为70～90%的pH7.2的PBS缓冲液，体积百分比为10～30%的小牛血清，及保护剂硫柳汞组成。本发明的第二方面是一种质控品，由含有HBsAg、抗-HCV、抗-HIV或梅毒抗体的血浆，或其组合配制而成，其中小牛血清的体积百分比为10～30%，溶剂为pH7.2的PBS缓冲液，并含有硫柳汞作为保护剂。本发明人的抗原抗体稀释液配制的质控品大大延长了质控样品的期限，使得质控样品能够在常温下运输，且用户收到后不加任何操作便可直接使用，并能保证质控品的质量。

摘要： 本发明公开了一种代谢组学检测用质控品及其质控方法，其包括4,4’‑亚甲基双(2‑氯苯胺)、对茴香胺、L‑酪氨酸甲酯、3‑氯苯胺、2，4‑二甲基喹啉、磺胺吡啶、阿特拉津、磺胺多辛、DL‑亮氨酸、N‑苯甲酰基‑L‑酪氨酸乙酯、6‑苯基‑2‑硫脲嘧啶、N‑(邻甲苯酰)甘氨酸、2‑甲基‑5‑硝基咪唑‑1‑乙醇、甘草次酸、黄烷酮、ε‑己内酯、2‑氨基吡啶的混合标样，本方法的17个标样来源于不同的物质类别，十分稳定，且配制简单，用量少，本发明质控品能够精准的反应色谱仪或质谱仪的仪器状态。

摘要： 本发明公开一种用于制备循环肿瘤细胞质控品的试剂盒，该试剂盒包括独立存在的DMSO和F68，其中，在应用于制备循环肿瘤细胞质控品时，DMSO按体积百分比计，应用的终浓度为20％‑60％；F68按质量体积百分比计，应用的终浓度为0.1％‑1％。本发明还公开一种循环肿瘤细胞质控品的制备方法。本发明提供的循环肿瘤细胞质控品的制备方法可以很好地保护细胞的细胞膜结构和膜蛋白、维持细胞形态和保存胞内物质，且操作简单，工艺稳定，制得的循环肿瘤细胞质控品可以长期在‑20°C保存。

摘要： 本发明公开了一种过敏原特异性IgE抗体复合质控品的制备方法及过敏原特异性IgE抗体复合质控品，制备方法具体如下：制备过敏原特异性IgE抗体；获得目的基因，得到人IgE的恒定区基因序列和可变区基因序列；根据人IgE的重链恒定区基因序列设计包含XhoⅠ酶切位点的引物，根据人IgE的轻链恒定区基因序列设计包含HindⅢ酶切位点的引物，构建含轻链信号肽和重链信号肽及人IgE重链和轻链C区基因片段表达空载体；构建不同过敏原的重组表达载体；转染细胞；克隆、鉴定与筛选；上述质控品的效价高、纯度较高，稀释线性、稳定性良好，在作为规模生产的质量控制、常规质控、性能验证及产品开发方面使用具有较高的使用价值。

摘要： 本发明提供一种用于检测FMR1基因CGG重复数的质控品，其包括如SEQ ID NO:6所示序列的单链DNA以及如SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5所示序列的引物，其中，所述单链DNA为SEQ ID NO:4、部分AluY序列与SEQ ID NO:5反向互补DNA序列组成的人工合成单链DNA。本发明还涉及采用上述质控品检测X染色体倍型和判断DNA模板量是否足量的方法以及含有该质控品的试剂盒。本发明在引入X染色体倍型监控系统的同时，采用非特异性探针杂交技术开发了一种针对TP‑PCR扩增体系中X染色体拷贝数和起始DNA模板量是否适宜的质控系统，以确保TP‑PCR检测阴性结果的可靠性，实现了对FMR1基因CGG重复数的准确检测。

摘要： 本发明公开了一种新型血小板质控品制备方法以及由该方法制备的血小板质控品的应用。该方法包括步骤：（1）在动物全血中加入抗凝剂，离心后得到富血小板血浆；（2）富血小板血浆再次离心得到上层乏血小板血浆和底部血小板，底部血小板经多次洗涤离心，得到浓缩血小板，加入载入液，37°C水浴，离心，得到载入保护剂的血小板；（3）载入保护剂的血小板中加入冻干缓冲液，放入‑60°C～‑80°C预冻18h～36h后冻干。冻干粉放置2°C‑8°C储存。该方法制备的血小板质控品不但可用于血小板计数，而且可适用于血小板体外粘附功能和聚集功能检测。

摘要： 本发明提供一种糖化血红蛋白质控品的制备方法，包括以下步骤：采集非糖尿病患者的血液样本，进行离心处理、去浆，得到红细胞；向红细胞中加入红细胞保存液，制得红细胞样本；将红细胞样本缓慢加入到分层液，离心得到分层的红细胞，每一密度的细胞分离液中均分散有与其适配的红细胞；将分层的红细胞分装于不同的试管内，向每一试管内加入生理盐水，得到红细胞悬浮液，调节所述红细胞悬浮液的血红蛋白浓度为120g/L，筛选出HbA1c值为3～5％的红细胞悬浮液，获得糖化血红蛋白质控品。本发明还提供一种质控品。本发明的制备方法能够批量生产低值糖化血红蛋白质控品。

摘要： 本发明公开了一种免疫组化染色的质控方法和质控品，质控方法包括以下过程：获得动物或可商业化的器官或组织，用所述器官或组织制作质控蜡块，对所述质控蜡块进行切片得质控片，所述质控片包括至少两种不同增殖细胞抗原密度的部位；将待检人样本与所述质控片同步进行免疫组化染色，分别获取免疫组化后的所述待检人样本的病理图像和所述质控片的质控图像；从所述质控图像中提取至少两种不同增殖细胞抗原密度的所述部位的增殖细胞抗原指数；将各所述部位的所述增殖细胞抗原指数分别与其对应的增殖细胞抗原标准指数进行比较，判断所述免疫组化染色的质量。本发明能够更准确、更客观、更全面、更定性定量的评价免疫组化的质量。

摘要： 本发明公开了一种基于微球的血小板聚集功能检测质控品及质控方法，该质控品通过以下方法制备得到：1)制备表面修饰有羧基的微球；2)微球表面标记：将微球表面羧基进行活化，然后偶联与激活剂对应的特异性受体，得到所述质控品；使用时，将所述质控品分散形成稳定的悬浮液，当加入激活剂后，质控品与激活剂会发生凝集反应，进而使体系的浊度发生变化，由此实现血小板聚集功能检测的质量控制。本发明提供的基于微球的血小板聚集功能检测质控品制备简单、成本低、方便使用，且性能稳定，可获得更可靠的检测结果，能够克服常规血液质控品不便保存、成本昂贵、重复性差、质控范围大等问题。本发明的方法简便易于操作，检测结果可靠性高。