PKC信号传导对ITP患儿T淋巴细胞增殖与凋亡的调控研究

摘要

经确诊的35例特发性血小板减少性紫癜（ITP）患儿为观测对象,男15例,女20例,年龄1岁～14岁,中位年龄5.3岁.正常对照30例为健康儿童,排除ITP及其它自身免疫性疾病,其中男13例,女17例,年龄1.5岁～12岁,中位年龄4.5岁.收集ITP患儿及健康儿童外周抗凝静脉血,分离纯化T细胞.以20%小牛血清RPMI 1640培养液调整T细胞浓度至106/ml,接种于24孔培养板中,每份标本接种6孔,编为3组,每组2孔.第1组为空白对照组、第2组加入蛋白激酶C（PKC）激动剂PMA、第3组同时加入激动剂PMA和抑制剂H-7,于37℃,5%Co2培养24、72h,采用CCK-8法检测T细胞的增殖能力,运用AnnexinFITC及PI荧光染液作双色流式细胞术检测T细胞的凋亡率.计算各组均数与标准差,用x±s表示,全部数据均经SAS8.22统计软件分析,组间差异的显著性用方差分析的q检验,P＜0.05为差异有统计学意义.