铜绿假单胞菌耐药性在生物被膜形成过程中的变化

摘要

目的研究铜绿假单胞菌遗传性耐药(gyrA基因突变和MexAB-OprM主动外排)在生物被膜形成过程中对药物抗性的作用. 方法通过PCR技术鉴定gyrA基因突变株和MexAB-OprM主动外排株,利用三亲杂交的方法将绿色荧光蛋白(GFP)基因转到铜绿假单胞菌药物敏感株中,测定gyrA基因突变株、MexAB-OprM主动外排株以及带有绿色荧光蛋白的铜绿假单胞菌在特氟隆上产生生物被膜耐药的规律. 结果筛选出gyrA基因突变株和MexAB-OprM主动外排株.通过三亲杂交成功构建了带有pGFPuv质粒的铜绿假单胞菌.将突变株和敏感株培养在最低杀菌浓度(MBC)的环丙沙星溶液中形成生物被膜使菌株的存活率均在50%以上. 结论比较遗传性耐药和生物被膜耐药的作用表明gyrA基因突变和主动外排在生物被膜耐药形成前期发挥主要作用,当生物被膜完全形成之后,铜绿假单胞菌的耐药性有可能是由生物被膜介导的.