一种伯氏疏螺旋体表达质粒的构建

摘要

目的构建一个具有较强遗传可操作性的大肠杆菌-伯氏疏螺旋体表达穿梭质粒,以期作为工具质粒在疏螺旋体中实现外源基因的可诱导表达。方法利用源自大肠杆菌的lac表达/诱导系统,在已有的穿梭质粒的基础上,通过分子生物学技术加入多克隆位点和HA、FLAG蛋白表达标签,增加其遗传可操作性。结果成功构建工具质粒pJJ275,可以用于伯氏疏螺旋体的基因可控制表达。以rpoS基因为例,将其克隆至pJJ275并转入疏螺旋体中,获得的菌株在IPTG存在的条件下可诱导表达目的蛋白RpoS及其控制下的0spC。结论构建的工具质粒易于分子生物学操作,可以实现疏螺旋体中外源基因的可控制表达。