广州市环境及空调冷却水中釜山军团菌的分离与鉴定

摘要

目的对广州市环境水源及中央空调冷却水中分离的两株疑似嗜肺军团菌进行分子生物学鉴定。方法通过培养特征、生化反应特性、军团菌属特异性引物PCR鉴定、PCR-酶切分型方法,16S rRNA基因、mip基因和rpoB基因序列分析,确定两株疑似嗜肺军团菌的分类地位。结果两株疑似嗜肺军团菌均为革兰氏阴性杆菌,在BCYEα平板上生长,36℃培养48 h可见白色菌落,氧化酶、明胶液化与马尿酸水解实验均为阳性,尿素酶、硝酸盐还原实验阴性,按表型特征极易鉴定为嗜肺军团菌。军团菌属特异性引物PCR扩增阳性,PCR-酶切分型结果为单一226 bp片段。16S rRNA基因、mip基因和rpoB基因序列比对与系统进化分析显示两株菌与釜山军团菌最相似。结论这是我国首次分离得到釜山军团菌,且同时存在于自然环境中和空调冷却塔水中;由于其生化特征,易错误鉴定为嗜肺军团菌,PCR-酶切分型与多基因鉴定的方法可有效鉴定釜山军团菌。