PCR酶切分型快速鉴定土壤和环境水中军团菌的方法

摘要

本发明公开了一种PCR酶切分型快速鉴定土壤和环境水中军团菌的方法，包括设计一对引物和一种限制性内切酶、配制CTEN基因组DNA提取液、提取DNA、PCR扩增、电泳、酶切分析等步骤。基于16S rRNA基因序列中的一个嗜肺军团菌特异的酶切位点，设计一对军团菌属特异引物来扩增含该特异位点的557bp片段，通过该PCR反应可鉴别军团菌，再通过HinfⅠ酶对PCR产物酶切，嗜肺军团菌可被消化为400bp和157bp片段。该方法操作简便快速，结果直观，且灵敏度高，特异性好，可以广泛应用于可疑菌株、水样本及其它样本中军团菌及嗜肺军团菌的快速鉴定。