耐多药结核分支杆菌耐药分子机制的研究

摘要

目的研究耐多药结核病(MDR-TB)临床分离株rPOB、KatG和rpsL基因突变在耐药性检测中的应用价值及鉴定是否含有质粒.方法采用聚合酶链反应单链构象多态性(PCR-SSCP)技术分析了46株同时耐异烟肼(INH)、利福平(RFP)、链霉素(SM)的多耐药临床分离株和42株药物敏感株的rPOB、KatG、rpsL基因突变.同时对67株结核分支杆菌临床分离株按碱性溶菌法抽提分离并鉴定是否含有质粒.结果以结核分支杆菌H37RV为对照,42株药物敏感株的rPOB、rpsL基因SSCP图谱正常,其特异性为100%;KatG基因有2株图谱异常,特异性为95.8%.rPOB、KatG、rpsL基因突变率分别为91.3%,60.9%,71.7%.结核分支杆菌30株药物敏感株和37株同时INH、RFP、SM的多耐药临床分离株均未提取分离与鉴定含有质粒.结论结核分支杆菌耐RFP、INH、SM耐药性的产生主要是由于rPOB、KatG和rpsL基因突变所致.未发现结核分支杆菌含有质粒及由质粒介导的耐药机制.