单精子测序技术在软骨发育不良患者植入前遗传学检测中的应用

摘要

目的探讨单精子测序技术在植入前遗传学检测中的应用价值。方法针对1例FGFR3基因新发变异导致的软骨发育不良患者, 应用单精子分离结合单精子测序技术完成单倍型的构建。用机械制动法分离20份单精子样本并进行全基因组扩增。设计变异位点及其上下游25个单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism, SNP）位点的扩增引物, 对扩增产物进行检测, 确定未携带以及携带致病变异的染色体单倍型。将12份胚胎滋养层细胞活检样本作为对象, 在完成全基因组扩增后, 通过高通量测序进行检测, 判断胚胎携带致病变异的情况。选取可用囊胚进行移植。于孕19周抽取羊水样本, 确认胎儿是否携带致病变异。结果通过单精子测序共筛选出8个SNP位点, 成功构建单倍型。植入前单倍型分析提示5枚胚胎携带致病变异, 7枚未携带。妊娠中期羊水基因检测证实胎儿未携带FGFR3基因c.1138G＆A变异。结论对于携带新发致病变异的男性患者, 可通过单精子测序筛选SNP位点, 通过连锁分析构建单倍型, 进行胚胎植入前遗传学检测。