长链PCR扩增低密度脂蛋白受体基因大片段的研究

摘要

为探讨扩增大片段ＤＮＡ的方法，应用长链聚合酶链反应（长链ＰＣＲ）法从外周血细胞基因组中扩增获得低密度脂蛋白（ＬＤＬ）受体基因６个片段，它们的长度分别为：５．５、５．０、７．０、６．８、３．５和８．３ｋｂ。各扩增产物都经Ｄｙｎａｌｂｅａｄｓ－Ｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ双脱氧固相测序法测定证实。讨论了长链ＰＣＲ技术中影响效率和特异性的关键参数，以及此项新技术在ＬＤＬ受体基因突变检测和家族性高胆固醇血症等基因诊断中的应用前景。为基因大片段的扩增提供了有效方法。