软骨蛋白聚糖降解与复发性多软骨炎病程进展的相关性

摘要

目的探讨监测复发性多软骨炎（RP）临床不同分期软骨蛋白聚糖酶及其降解表位变化对病情判断的意义。方法分别采用免疫组织化学和免疫印迹法（WB）检测40例RP患者（稳定期组22例、活动期组18例）和20例意外死亡健康者（正常对照组）耳廓软骨组织基质中软骨蛋白聚糖酶降解表位表达情况;同时分别采用实时荧光定量反转录聚合酶链反应（RT-PCR）和WB检测软骨蛋白聚糖酶-1,2 mRNA及蛋白质表达水平;并分析比较各组中蛋白聚糖酶降解表位表达和蛋白聚糖酶-1,2 mRNA及蛋白质表达的差异。结果实时荧光定量RT-PCR检测正常对照组软骨蛋白聚糖酶-1.2 mRNA 2-ΔΔCt值分别为1.00±0.26、1.00±0.27,RP稳定期组分别为1.47±0.11、1.57±0.13,RP活动期组分别为2.09±0.12、2.09±0.19。经单因素方差分析,各组间差异均有统计学意义（F分别为299.113和459.013,P均＜0.01）。进一步两两比较,RP活动期组、RP稳定期组软骨蛋白聚糖酶-1,2mRNA水平比正常对照组显著升高（P＜0.01）,RP活动期组比RP稳定期组显著升高（P＜0.01）。WB检测软骨蛋白聚糖酶-1,2蛋白质表达水平,RP活动期组分别在相对分子质量约68 000、73 000处出现明显条带,RP稳定期组相应位置有较弱条带出现,而正常对照组无明显条带。WB检测RP活动期组降解表位NITEGE、ARGSV的表达分别在相对分子质量约70 000、48 000处出现明显条带,RP稳定期组相应位置有较弱条带出现,而正常对照组无明显条带出现。免疫组织化学检测NITEGE、ARGSV表位的表达,在正常软骨基质中无明显表达（无红色着染）,RP稳定期组和RP活动期组表位表达明显增加（呈明显红色着染）。结论 RP患者软骨蛋白聚糖酶在mRNA及蛋白质水平表达增强;蛋白聚糖降解增加,并与疾病的严重程度相关联。