ECMO通过TLR4/NF-κB通路对家兔延迟复苏失血性休克肠损伤的影响

摘要

目的 探讨体外膜肺(ECMO)通过Toll样受体4/核因子-κB(TLR4/NF-κB)通路对延迟复苏失血性休克兔肠损伤的影响及调控机制.方法 50只新西兰大白兔,取10只为对照组,40只采用股动脉放血法制备延迟复苏兔模型,36只存活兔随机分为休克组、常规复苏组、ECMO复苏组和ECMO+TLR激动剂组,每组9只.休克180 min后,对照组和休克组不进行任何复苏处理,常规复苏组立即经颈静脉回输全血及两倍放血量的乳酸钠林格液行常规复苏,ECMO复苏组行常规复苏和ECMO转流复苏,ECMO+TLR激动剂组在ECMO复苏组基础上经颈静脉注射LPS.复苏毕,检测各组血清二胺氧化酶(DAO)水平及细菌异位率,HE染色观察回肠组织病理学改变,ELISA法检测回肠组织中IL-6、TNF-α水平,RT-qPCR法和Western blot法检测回肠组织中TLR4、NF-κB p65、claudin、occludin mRNA和蛋白表达情况.结果 对照组肠黏膜形态无明显异常,休克组肠黏膜结构破坏,绒毛大量脱落,大量炎性细胞浸润及上皮细胞坏死,常规复苏组和ECMO组肠黏膜结构基本正常,ECMO组病变更轻,ECMO+TLR4激动剂组较ECMO组病变加重,但较休克组轻.与休克组比较,常规复苏组、ECMO复苏组及ECMO+TLR激动剂组血清DAO、细菌异位率、回肠组织中IL-6、TNF-α水平、TLR4、NF-κB p65 mRNA和蛋白相对表达量降低,其中ECMO复苏组低于常规复苏组和ECMO+TLR激动剂组,常规复苏组低于ECMO+TLR激动剂组,但均高于对照组(P<0.05);与休克组比较,常规复苏组、ECMO复苏组及ECMO+TLR激动剂组claudin、occludin mRNA和蛋白相对表达量升高,其中ECMO复苏组高于常规复苏组和ECMO+TLR激动剂组,常规复苏组高于ECMO+TLR激动剂组,但均低于对照组(P<0.05).结论 ECMO可通过抑制TLR4/NF-κB炎性轴减轻失血性休克兔延迟复苏后肠损伤.