沙立度胺治疗多发性骨髓瘤基因表达的改变

摘要

目的应用抑制差减杂交法研究沙立度胺(反应停)对多发性骨髓瘤(MM)骨髓细胞基因表达的影响,探讨反应停治疗MM的分子机制.方法随机选取1例初发MM患者,给予反应停治疗,治疗前后均留取骨髓,提取总RNA并分离mRNA,逆转录合成cDNA.分A、B组分别进行抑制差减杂交,所得的差减cDNA利用抑制PCR进行选择性扩增,并连接于T 载体,转化JM109感受态菌,构成差减cDNA文库,经蓝白斑筛选后挑选白色菌落,提取质粒,进行序列测定,将所得的每一个序列通过Email发往美国国立卫生研究院生物信息中心,进行同源性比较分析.结果 A 组分离出8个下调基因片段包含7个已知基因:人核糖体蛋白L19,人IgGλ链可变区,含 Alu 重复组分,NADH-泛醌氧化还原酶链2,延长因子1-γ,人β珠球蛋白区,人40S核糖体蛋白S4.B 组分离出的7个上调基因片段包含6个已知基因:细胞色素B,被 1,25-二羟维生素D3 上调基因(VDUP1),NADH-泛醌氧化还原酶20Kd亚单位,μ-需钙蛋白酶大亚单位,转录-调控肿瘤蛋白1 (TPT1),外被体蛋白α亚单位.结论反应停通过改变上述基因的表达,产生促进凋亡和抗血管生成作用.