普鲁卡因通过调控TLR4/NF-κB通路对缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤的影响

摘要

目的探讨普鲁卡因(PCA)通过调控Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)通路对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞损伤的影响。方法选择H9c2心肌细胞通过体外培养进行实验,并建立H/R细胞模型,将细胞分为对照组(Con组)、H/R组、PCA低剂量组(H/R+PCA-L组)、PCA中剂量组(H/R+PCA-M组)、PCA高剂量组(H/R+PCA-H组)、H/R+PCA组和H/R+PCA+二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)组(H/R+PCA+PDTC组)。通过四甲基偶氮唑盐(MTT)、流式细胞术实验检测各组细胞活力和凋亡情况;蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测Bcl-2、Bax和TLR4/NF-κB信号通路相关蛋白的表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达。结果与Con组比较,H/R组细胞活力、Bcl-2蛋白表达明显降低(P<0.05),细胞凋亡率、Bax蛋白表达、LDH、MDA、IL-1β、IL-6、TNF-α、TLR4蛋白表达、磷酸化核因子-κB(p-NF-κB)p65蛋白表达、磷酸化NF-κB抑制蛋白(p-IκBα)蛋白表达明显增加(P<0.05);与H/R组比较,H/R+PCA-L组、H/R+PCA-M组和H/R+PCA-H组细胞活力、Bcl-2蛋白表达增加(P<0.05),细胞凋亡率、Bax蛋白表达、LDH、MDA、IL-1β、IL-6、TNF-α、TLR4蛋白表达、p-NF-κB p65蛋白表达、p-IκBα蛋白表达降低(P<0.05)。与H/R+PCA组比较,H/R+PCA+PDTC组细胞活力、Bcl-2蛋白表达增加(P<0.05),细胞凋亡率、Bax蛋白表达、LDH、MDA、IL-1β、IL-6、TNF-α水平降低(P<0.05)。结论PCA通过抑制TLR4/NF-κB通路减缓H/R诱导的心肌细胞凋亡、氧化应激和炎症反应,并促进细胞的活力。