益母草碱预处理对大鼠缺氧/复氧心肌细胞存活能力及TLR4/NF-κB通路蛋白表达的影响

摘要

目的:探讨益母草碱预处理对大鼠缺氧/复氧心肌细胞存活能力的影响及潜在的分子机制.方法:大鼠心肌细胞H9 c2分为3组.正常对照组细胞常规培养;缺氧/复氧组细胞采用缺氧3 h、复氧2 h方法诱导损伤;益母草碱组细胞先以20μmol/L的益母草碱预处理24 h,然后进行缺氧/复氧处理.采用CCK-8法检测3组细胞存活能力,AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,ELISA法检测细胞培养上清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-6含量,Western blot法检测细胞中Cleaved Caspase-3、Toll样受体4(TLR4)、核因子-κB(NF-κB)和抑制蛋白IκBα的表达.结果:与正常对照组比较,缺氧/复氧组心肌细胞存活率下降,凋亡率升高,TNF-α、IL-1β和IL-6分泌量增加,细胞中Cleaved Caspase-3、TLR4和NF-κB蛋白表达上调,IκBα蛋白表达下调(P<0.05).与缺氧/复氧组比较,益母草碱组细胞存活率升高,细胞凋亡率下降,TNF-α、IL-1β和IL-6分泌量降低,细胞中Cleaved Caspase-3、TLR4、NF-κB蛋白表达下调,IκBα蛋白表达上调(P<0.05).结论:益母草碱可通过抑制TLR4/NF-κB信号通路,减轻缺氧/复氧心肌细胞损伤.