PI3K-Akt-eNOS信号转导通路在丙泊酚减轻缺氧/复氧损伤致乳鼠心肌细胞凋亡中的作用

摘要

目的 评价磷脂酰肌醇-3-激酶/丝氨酸-苏氨酸激酶/内皮型一氧化氮合酶(PI3K-Akt-eNOS)信号转导通路在丙泊酚减轻缺氧/复氧致乳鼠心肌细胞凋亡中的作用.方法 乳鼠心肌细胞随机分为4组:对照组(Ⅰ组)、缺氧复氧组(Ⅱ组)、缺氧复氧+丙泊酚组(Ⅲ组)、缺氧复氧+丙泊酚+渥曼青霉素组(Ⅳ组).Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组分别持续通以95%N2、5%CO2、37 ℃温育40 min,再持续通以95%O2、5%CO2、37 ℃温育20 min制备心肌细胞缺氧/复氧损伤模型.Ⅲ组进行丙泊酚处理,缺氧时加入丙泊酚50 μmol/L.Ⅳ组在丙泊酚处理前10 min给予100 nmol/L渥曼青霉素.复氧20 min后,以TUNEL染色法测定心肌细胞凋亡率,Western blot法测定心肌细胞Akt、磷酸化Akt(p-Akt)和eNOS、磷酸化eNOS(p-eNOS)蛋白表达.结果 与Ⅰ组比较,其余各组心肌细胞凋亡率显著升高,p-Akt和 p-eNOS蛋白表达水平上调(P<0.05);与Ⅱ组比较,Ⅲ组心肌细胞凋亡率降低,p-Akt和p-eNOS蛋白表达水平进一步上调(P<0.05);Ⅳ组上述各指标差异无统计学意义(P＞0.05);与Ⅲ组比较,Ⅳ组心肌细胞凋亡率升高,p-Akt和p-eNOS蛋白表达水平下调(P<0.05).结论 PI3K-Akt-eNOS信号转导通路介导了丙泊酚减轻缺氧/复氧致乳鼠心肌细胞凋亡的作用.