茶黄素对新生大鼠心肌缺血保护作用的机制研究

摘要

目的:探讨茶黄素对新生大鼠心肌缺血保护作用的机制研究。方法:7日龄无特定病原体(SPF)新生Sprague-Dawley(SD)大鼠25只随机分为对照组、异丙肾上腺素(ISO)诱导组、茶黄素12.5 mg/kg组、茶黄素25.0 mg/kg组和茶黄素50.0 mg/kg组,每组5只。茶黄素12.5 mg/kg组、茶黄素25.0mg/kg组和茶黄素50.0 mg/kg组分别腹腔注射茶黄素12.5、25.0、50.0 mg/kg预处理7 d,每日1次。除对照组外,其余各组新生大鼠在预处理最后2 d皮下注射ISO 85 mg/kg构建心肌缺血模型。心脏超声检测心率(HR)、左室壁相对厚度(LVWT)、左室收缩末期容积(LVESV)和左室射血分数(LVEF);苏木精-伊红(HE)染色检测心脏组织损伤程度;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌红蛋白(Mb)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和髓过氧化物酶(MPO)的蛋白相对表达量;免疫组化检测Caspase-3阳性表达量;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测Cleaved Caspase-9、Bcl-2、Bax、鼠双微体2基因(MDM2)、p53、磷酸化的核因子E2相关因子2(p-Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)和NADPH奎宁氧化还原酶1(NQO1)的蛋白相对表达量。结果:HE染色结果显示,与对照组比较,ISO诱导组大鼠心肌间隙增宽,心肌细胞严重肿胀,附着炎性细胞增加,结构变得模糊;在茶黄素治疗后,与ISO诱导组比较,以上现象均得到缓解。与对照组比较,ISO诱导组HR、LVWT和LVEF明显降低,LVESV明显升高(P<0.05或P<0.01);cTnI、CK-MB、Mb、MDA和MPO明显升高,SOD明显降低(P<0.05或P<0.01);Caspase-3阳性表达量、Cleaved Caspase-9/Caspase-9和p53的蛋白相对表达量明显上调,Bcl-2/Bax、MDM2、p-Nrf2/Nrf2、HO-1和NQO1的蛋白相对表达量明显下调(P<0.05)。与ISO诱导组比较,茶黄素25.0 mg/kg组、茶黄素50.0 mg/kg组HR、LVWT和LVEF明显升高,LVESV明显降低(P<0.05或P<0.01);cTnI、CK-MB、Mb、MDA和MPO明显降低,SOD明显升高(P<0.05或P<0.01);Caspase-3阳性表达量、Cleaved Caspase-9/Caspase-9和p53的蛋白相对表达量明显下调,Bcl-2/Bax、MDM2、p-Nrf2/Nrf2、HO-1和NQO1的蛋白相对表达量明显上调(P<0.05)。结论:茶黄素可减轻ISO诱导新生大鼠心肌缺血,其机制可能与调节Nrf2/HO-1/NQO1信号通路、减轻细胞凋亡和氧化应激有关。