四逆软肝方对人肝星状细胞株LX-2增殖、凋亡和活化的影响

摘要

目的:通过体外细胞实验研究四逆软肝方对肝星状细胞(HSC)增殖、凋亡和活化的影响.方法:分别用正常培养液和多剂量的四逆软肝方水煎液对人肝星状细胞LX-2株进行干预培养48 h.采用CCK-8法检测人肝星状细胞LX-2株的增殖和细胞毒性.采用Annexin-V FITC/PI双染色法检测细胞凋亡情况.采用免疫荧光染色法测定LX-2细胞Cleaved-caspase 3、TIMP-1和TGF-β1的相对含量.用Western blot分别检测LX-2细胞Bcl-2、Bax、α-SMA、β-catenin和TIMP-1蛋白表达的相对含量.结果:四逆软肝方可抑制LX-2细胞增殖,并通过caspase依赖和线粒体依赖途径诱导细胞凋亡.四逆软肝方可能通过β-catenin途径抑制LX-2细胞的活化.TIMP-1和TGF-β1蛋白的降低促进了纤维化的逆转.结论:四逆软肝方在体外可诱导LX-2细胞凋亡,抑制细胞增殖,降低LX-2细胞活性,促使细胞外基质降解,可能是其临床逆转肝纤维化、肝硬化的重要作用机制.