益气活血复方通过自噬调控心力衰竭大鼠心肌能量代谢的研究

摘要

目的 观察益气活血复方对心力衰竭(心衰)大鼠心肌能量代谢的影响,并探讨其作用机制.方法 选择SPF级健康雄性SD大鼠48只,按随机数字表法分为假手术组、模型组、中药组和西药组,每组12只.采用结扎左冠状动脉(冠脉)前降支的方法复制心肌梗死后心衰模型;假手术组仅在心脏左冠脉前降支相同部位穿线但不结扎.制模后中药组给予益气活血中药6.0 g·kg-1·d-1灌胃(由人参、麦冬、五味子、川芎、丹参、水蛭、肉桂、茯苓、甘草组成,由西京医院中药制剂中心制备成颗粒剂,每袋10 g);西药组给予赖诺普利2 mg·kg-1·d-1灌胃;假手术组和模型组给予等体积蒸馏水灌胃;各组均每日灌胃1次、连续灌胃30 d.35 d后用超声心动图检测大鼠心脏功能;处死大鼠取心脏,苏木素-伊红(HE)染色后观察心肌组织病理学变化;采用免疫组化法检测心肌微管相关蛋白轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)、溶酶体相关蛋白(LAMP2)水平;用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血浆N末端钠尿肽前体(NT-proBNP)、游离脂肪酸(FFA)和心肌组织三磷酸腺苷(ATP)、过氧化物酶增殖物激活受体-α(PPAR-α)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)、LAMP2、LC3Ⅱ水平.结果 与假手术组比较,模型组左室舒张期末内径〔LVEDD(mm):8.43±0.57比7.18±0.62〕和左室收缩期末内径〔LVESD(mm):4.73±0.69比3.65±0.51〕均显著升高(均P<0.05),左室射血分数(LVEF:0.42±0.08比0.72±0.05)、左室短轴缩短率〔FS:(29.71±8.36)％比(51.48±3.27)％〕均明显降低(均P<0.05),心肌脂肪沉积和血浆NT-proBNP(μg/L:1.73±0.12比0.36±0.04)、FFA(mmol/L:1.50±0.11比0.28±0.13)、LC3Ⅱ(ng/g:23.76±2.43比18.24±2.51)含量及LC3Ⅱ阳性表达(灰度值:1.27±0.09比0.89±0.07)均明显增加(均P<0.05),LAMP2(ng/g:6.12±0.93比88.74±7.59)、GLUT4(ng/g:4.50±0.07比10.28±0.61)、PPAR-α(ng/g:3.59±1.04比25.84±2.55)和ATP(ng/g:1.96±0.06比7.30±0.11)含量及LAMP2阳性表达(灰度值:0.39±0.03比5.31±0.89)均明显降低(均P<0.05).与模型组比较,中药组和西药组LVEDD和LVESD均显著降低,LVEF和FS均明显升高,LC3Ⅱ、LAMP2、GLUT4、PPAR-α和ATP含量及LC3Ⅱ、LAMP2阳性表达均明显增加,NT-proBNP和FFA含量降低,且中药组和西药组对LVEDD(mm:7.32±0.54比7.36±0.51)、LVESD(mm:3.66±0.55比3.68±0.40)、LVEF(0.62±0.03比0.54±0.07)、FS〔(45.92±3.57)％比(33.46±4.22)％〕的改善作用相当(均P>0.05),但中药组对LC3Ⅱ(ng/g:79.83±9.50比51.68±7.45)、LAMP2(ng/g:84.61±5.57比19.63±1.87)、PPAR-α(ng/g:32.47±4.61比16.53±2.15)、GLUT4(ng/g:8.73±0.54比4.64±0.05)、ATP(ng/g:5.12±0.04比4.33±0.02)、NT-proBNP(μg/L:0.58±0.05比1.03±0.08)、FFA(mmol/L:0.31±0.06比0.78±0.02)以及LC3Ⅱ(灰度值:4.46±0.54比2.46±0.12)、LAMP2(灰度值:5.08±0.61比3.11±0.25)阳性表达水平的改善程度明显优于西药组(均P<0.05).结论 益气活血复方能增强心衰大鼠心脏自噬,重塑心肌能量代谢,改善心功能.