cyclinD1/E2F通路在苯并（a）芘引起人胚肺成纤维细胞周期改变中的作用

摘要

目的探讨细胞周期蛋白D1（cyclin D1）/细胞周期蛋白依赖激酶4（CDK4）-E2F-1/4通路在苯并（a）芘[B（a）P]引起的人胚肺成纤维细胞（HELF）周期改变中的作用。方法分别用2μmol/L的B（a）P作用HELF 24 h和100μmol/L B（a）P作用3次,每次24 h,细胞具有转化细胞的部分特征（T-HELF）。用转染反义cyclin D1和CDK4质粒的HELF（A-D1,A-K4）和T-HELF（T-A-D1,T-A-K4）研究cy-clin D1/CDK4与E2F-1/4的上下游关系。用流式细胞仪和Western blot法检测细胞周期、cyclin D1、CDK4和E2F-1/4蛋白表达的改变。结果2μmol/L B（a）P作用24 h HELF中G1期细胞数明显减少。在A-D1和A-K4的HELF中,cyclin D1和CDK4表达的抑制阻断了由B（a）P引起的细胞周期从G1期进入S期的变化。B（a）P刺激后HELF中cyclin D1和E2F-1的表达明显增加。在A-D1中,E2F-1的高表达被抑制。B（a）P作用A-K4细胞后,CDK4表达明显升高,E2F-4表达明显降低。T-A-D1和T-A-K4的T-HELF多数停留在G1期。与HELF相比,T-HELF中cyclin D1的表达明显增加;与T-HELF相比,T-A-D1和T-A-K4中E2F-4表达明显增加。结论在2μmol/L B（a）P作用的HELF中,B（a）P通过cyclin D1/CDK4-E2F-1/4信号转导通路引起细胞周期的改变。在T-HELF中,B（a）P通过cyclin D1/CDK4-E2F-4信号转导通路引起细胞周期的改变。