丙烯酰胺诱导小鼠淋巴瘤细胞tk基因突变谱的实验研究

摘要

目的 为研究丙烯酰胺（AA）致基因突变的机制提供实验依据。方法 挑选经AA诱导的小鼠淋巴瘤L5178Y3.2.7c tk+/-细胞tk基因突变子（tk-/-）,提取基因组DNA,用等位基因特异性聚合酶链反应（PCR）扩增、杂合性缺失（LOH）分析、序列分析等技术,分析其突变谱。结果 AA诱导突变体tk基因LOH发生率为78.8%。LOH的发生率随AA剂量的增加呈上升趋势,染毒剂量越大,tk等位基因缺失的发生就越严重。在大集落（LC）中,AA低剂量组（150、300μg/ml）诱导LOH的发生率（25. 0%、33.3%）与自发突变组和AA高剂量组（600、750μg/ml） LOH的发生率（66. 7%、77. 8%、85.7%）相比,差异均有统计学意义（P＜0.05）。序列分析证实,AA诱导的tk基因点突变主要为碱基置换以及1个移码,其中碱基置换主要的类型为T:G→G:T的颠换。结论 AA诱导的tk基因突变谱是以功能性等位基因缺失为主的突变类型,其次是碱基置换,移码较少发生。