IL-18通过下调CXCL9/CXCL10募集肿瘤相关巨噬细胞促进口腔鳞癌病灶转移

摘要

目的:探讨IL-18在口腔鳞癌(OSCC)患者肿瘤组织中的表达水平及肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)对OSCC肺转移病灶形成的影响.方法:本研究共纳入2015年1月至2017年12月我院收治的38例OSCC患者,另选取47例同期在我院体检中心进行体检的健康志愿者作为对照.ELISA法检测各组研究对象血清IL-18水平;免疫组化和Western blot分析OSCC患者肿瘤组织和癌旁组织中IL-18表达.建立小鼠肺转移模型,采用慢病毒转染法构建OSCCTca8113IL-18高表达细胞系(Tca8113-IL-18),Western blot检测IL-18、AKT、P-AKT、mTOR和P-mTOR表达.裸鼠尾静脉注射Tca8113与Tca8113-IL-18细胞,45d后统计小鼠肺组织转移病灶数,CD11b和F4/80标记后流式细胞术分选巨噬细胞;ELISA检测小鼠血清中CXCL9、CX-CL10、CSF-1和CCL-2表达;qRT-PCR检测小鼠肿瘤组织CXCL9、CXCL10、CSF-1和CCL-2表达;Western blot检测CXCL9、CX-CL10、AKT、P-AKT、mTOR和P-mTOR表达.结果:OSCC患者血清中IL-18表达显著高于健康志愿者,肿瘤组织中IL-18表达显著高于癌旁组织(P＜0.05).IL-18在Tca8113-IL-18高表达,成功构建高表达细胞系,P-AKT和P-mTOR在Tca8113-IL-18细胞系中表达高于Tca8113细胞.IL-18可显著增加Tca8113在裸鼠肺部形成转移病灶数(P＜0.05),Tca8113-IL-18组裸鼠肺部转移瘤数明显高于Tca8113组.流式细胞术分选结果显示,Tca8113-IL-18组裸鼠肿瘤组织中TAMs数明显增多.ELISA结果显示Tca8113-IL-18裸鼠血清中CXCL9和CXCL10表达明显低于Tca8113组,而CSF-1和CCL-2表达明显升高.qRT-PCR和Western blot显示Tca8113-IL-18肿瘤组织中CXCL9和CXCL10表达明显低于Tca8113组,而CSF-1和CCL-2表达明显增加,Tca8113-IL-18组P-AKT和P-mTOR表达高于Tca8113组.结论:OSCC患者血清和肿瘤组织中IL-18表达显著升高,IL-18可能通过激活PI3K/AKT/mTOR信号通路下调CXCL9、CXCL10表达,从而募集TAMs促进OSCC肺部转移病灶形成.