桃叶珊瑚苷通过调控miR-30a-5p表达对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响

摘要

目的:探讨桃叶珊瑚苷是否通过调控miR-30a-5p表达,影响高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤.方法:肾小管上皮细胞HK-2分为Con组(5.5 mmol/L葡萄糖)、HG组(30 mmol/L葡萄糖)、HG+AU-L组(30 mmol/L葡萄糖+25 μmol/L桃叶珊瑚苷)、HG+AU-M组(30 mmol/L葡萄糖+50μmol/L桃叶珊瑚苷)、HG+AU-H组(30 mmol/L葡萄糖+100 μmol/L桃叶珊瑚苷)、HG+miR-NC组(30 mmol/L葡萄糖+转染miR-NC)、HG+miR-30a-5p组(30 mmol/L葡萄糖+转染miR-30a-5p)、HG+AU+anti-miR-NC组(30 mmol/L葡萄糖+100μmol/L桃叶珊瑚苷+转染anti-miR-NC)、HG+AU+anti-miR-30a-5p组(30 mmol/L葡萄糖+100 μmol/L桃叶珊瑚苷+转染anti-miR-30a-5p).应用ELISA、Annexin V-FITC/PI双染法、Western blot和逆转录定量聚合酶链反应(RT-qPCR)分别检测IL-1β、TNF-α表达、细胞凋亡、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达和miR-30a-5p表达.结果:与Con组比较,HG组肾小管上皮细胞IL-1β、TNF-α表达、细胞凋亡率、Bax蛋白表达急剧增加,Bcl-2蛋白、miR-30a-5p表达水平降低;相较于HG组,HG+AU-L、HG+AU-M、HG+AU-H组肾小管上皮细胞IL-1β、TNF-α表达、凋亡率、Bax蛋白表达逐渐降低,Bcl-2蛋白、miR-30a-5p表达逐渐升高,并均呈浓度依赖性;HG+miR-30a-5p组肾小管上皮细胞中miR-30a-5p、Bcl-2蛋白表达水平高于HG+miR-NC组,IL-1β、TNF-α表达、凋亡率、Bax蛋白表达水平低于HG+miR-NC组;与HG+AU+anti-miR-NC组比较,HG+AU+anti-miR-30a-5p组肾小管上皮细胞中miR-30a-5p、Bcl-2蛋白表达水平减少,IL-1β、TNF-α表达、细胞凋亡率、Bax蛋白表达水平均升高;上述差异均具有统计学意义(P＜0.05).结论:桃叶珊瑚苷可能通过上调miR-30a-5p的表达,抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞炎症因子表达并减轻细胞凋亡.