CD14、MD-2在LPS致乳腺上皮细胞炎症中的作用

摘要

目的:探究LPS致乳腺上皮细胞(MECs)炎症中白细胞分化抗原14(CD14)、髓样分化蛋白2(MD-2)的作用。方法:采用MTT法和流式细胞术检测LPS对小鼠MECs的刺激条件,PCR和流式细胞术检测MECs上CD14、MD-2的表达;siRNA沉默CD14、MD-2基因,通过流式细胞术检测FITC-LPS与细胞的结合率,ELISA法检测LPS介导炎症因子TNF-α、IL-6及IL-1β表达来研究CD14、MD-2在LPS致MECs炎症中的作用。结果:LPS作用于细胞IC50为76.83μg/ml;当5~10μg/ml浓度的LPS刺激细胞6~12 h时,LPS与细胞的结合趋于饱和;基因和蛋白水平都表明MECs上有CD14、MD-2表达,CD14、MD-2基因沉默后,LPS与小鼠MECs结合率被抑制,同LPS组相比分别下降7.88%、3.00%、13.41%(P<0.01),同时LPS介导细胞分泌TNF-α、IL-6及IL-1β的量(P<0.05、P<0.01)也显著或极显著下降。结论:MECs上有CD14、MD-2的存在,它们是乳腺细胞胞外LPS-TLR4炎症信号途径重要基因。