地塞米松对烟草烟雾刺激的人巨噬细胞沉默信息调节因子1表达影响的实验研究

摘要

目的:探讨地塞米松(DEX)对烟草烟雾提取物(CSE)刺激的人巨噬细胞中沉默信息调节因子1(SIRT1)表达的影响及其机制.方法:体外培养人类单核细胞系U937细胞,用佛波酯将其诱导分化为人巨噬细胞,将细胞分为5组:对照组(Control)、CSE组(CSE)、地塞米松组(DEX)、烟酰胺组(NAM)、吡咯烷二硫氨基甲酸组(PDTC).CSE组用1％浓度烟草烟雾提取物刺激24 h;地塞米松组用10-6 mol/L地塞米松预处理24 h后,用1％浓度CSE刺激24 h;烟酰胺组20 mmol/L浓度烟酰胺孵育24 h;吡咯烷二硫氨基甲酸组用20 nmol/L浓度吡咯烷二硫氨基甲酸孵育24 h.处理后分别用荧光酶标仪检测各组细胞ROS释放水平,ELISA试剂盒检测细胞上清液IL-6的浓度;蛋白印迹实验(Western blot)检测SIRT1和NF-κB蛋白表达.结果:烟草烟雾引起人巨噬细胞释放ROS增加(P<0.01),促进IL-6释放(P<0.01),抑制细胞中SIRT1表达以及促进转录因子NF-κB蛋白表达(P<0.01).DEX可抑制烟草烟雾诱导的人巨噬细胞上清中IL-6的含量(P<0.01),降低烟草烟雾暴露引起的人巨噬细胞内ROS释放(P<0.01);下调烟草烟雾诱导的人巨噬细胞NF-κB的表达(P<0.01),增强烟草烟雾抑制的人巨噬细胞SIRT1蛋白表达(P<0.01).结论:DEX通过抑制CSE引起的ROS释放从而降低CSE对SIRT1的损害,进而抑制NF-κB表达,最终减少炎症介质IL-6释放.