人重组TFAR19蛋白对白血病细胞株HL-60的促凋亡效应

摘要

目的:对一种新发现的凋亡相关基因TFAR19进行蛋白质水平的促凋亡效应研究,并对其作用机理进行初步的探讨. 方法:利用离子交换层析对大肠杆菌表达的人重组TFAR19蛋白进行纯化,将其加入到培养的白血病细胞株HL-60,通过DNA片段化、PI及Annexin V标记进行流式细胞仪分析,观察TFAR19蛋白的促凋亡效应.利用FITC标记TFAR19蛋白,分析其与细胞的结合及定位.利用Caspase-3抑制剂DEVD-fmk研究TFAR19的凋亡信号转导途径.结果:高纯度的重组TFAR19蛋白剂量依赖性地促进撤除血清的HL-60细胞的凋亡,最高可使82%细胞凋亡,对照为30%.荧光标记的TFAR19蛋白能与HL-60细胞结合,主要定位于细胞核.DEVE-fmk可部分抑制TFAR19蛋白的促凋亡效应.结论:TFAR19蛋白能够直接进入HL-60细胞,发挥其促进细胞凋亡的效应.这一效应部分地与Caspase-3的凋亡执行效应有关.