重组人血管内皮抑素对白血病K562及K562/A02细胞株增殖及凋亡的影响

摘要

目的：1)探讨重组人血管内皮抑素(Recombinant Human Endostatin,rhES)对慢性粒细胞白血病细胞株K562及慢性粒细胞白血病多药耐药细胞株K562/A02的增殖抑制作用;2)观察K562、K562/A02细胞株经rhES作用后,相关凋亡蛋白BCL-2、BCL-XL及血管内皮生长因子VEGF表达的变化情况.rn 方法：1）以K562细胞及K562/A02细胞株为实验细胞，倒置显微镜下观察K562及K562/A02细胞的细胞形态、生长状态;计数法绘制细胞生长曲线;2)CCK-8检测0,10,20,50,100,200和400μg/ml的rhES作用K562, K562/A02细胞6-72h后的细胞活性并计算IC5O;3)选择IC50浓度作用于K562, K562/A02细胞株，流式细胞术检测经rhES作用后K562,K562/A02的凋亡率;4)使用ELISA及实时荧光定量RT-PCR检测BCL-2, BCL-XL, VEGF的表达。rn 结果:1) CCK-8结果显示，rhES具有诱导K562及K562/A02细胞株凋亡的作用;rhES作用K562, K562/A02细胞株24h后，细胞生长抑制的IC50为100μg/ml,48h后的IC50为200μg/ml; 2)经流式细胞术检测:100μg/ml与200μg/mlrhES作用于K562细胞24h，细胞凋亡率分别为13.60%和14.84%，作用于K562细胞48h后，细胞凋亡率分别为20.02%和23.64%a;100μg/ml与200μg/ml rhES作用于K562/A02细胞24h，细胞凋亡率分别为10.97%a和16.57%a，作用于K562/A02细胞48h后，细胞凋亡率分别为13.33%和15.42%a;3) ELISA与RT-PCR检测结果显示，100μg/ml, 200μg/ml rhES分别作用K562, K562/A02细胞24h,48h后，BCL-2, BCL-XL, VEGF的表达均有下降，与未加药物组相比差异具有显著的统计学意义(P＜0.05)。rn 结论:rhES可能可用于CML的治疗。