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阴离子交换层析法纯化gp130单克隆抗体B-S12

         

摘要

目的:建立一种从小鼠腹水中获得高纯度、活性好、纯化过程易于放大的抗gp130单克隆抗体B-S12的纯化方法.方法:经硫酸铵沉淀等预处理后的腹水样品,在阴离子交换层析柱上进行分离纯化,用MTT法检测纯化后抗体的生物学活性.结果:腹水样品经硫酸铵沉淀、PBS复溶,用pH 7.0、20 mmol/L Tris-HCl缓冲溶液稀释10倍后上强阴离子交换层析柱,NaCl梯度洗脱,可获得纯度大于95%的B-S12抗体,回收率达73%,在体外对XG-2细胞有明显的促增殖作用.结论:建立了快速高效从小鼠腹水中纯化B-S12的方法,为该抗体的进一步应用提供了必要的实验基础.

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