脂质体介导的IDO基因转染未成熟树突状细胞对其成熟性及功能的影响

摘要

目的:探讨脂质体介导的IDO基因转染对未成熟树突状细胞(Immature dendritic cells,imDCs)的成熟性及功能的影响.方法:从BALB/c小鼠骨髓培养imDCs,形态学观察后用流式细胞术鉴定imDC后,将其分为IDO+-imDC组:重组pEGFP-N1-IDO质粒在脂质体介导下转染imDCs;IDO--imDC组:pEGFP-N1空质粒转染imDCs;imDCs组:imDCs不做特殊处理;mDC组:将培养的imDC用TNF-α诱导成熟.流式细胞术检测IDO基因转染imDC细胞后细胞表型是否发生变化.Western blot检测各组IDO蛋白表达.混合淋巴细胞反应检测各组在体外刺激T淋巴细胞增殖的能力.结果:BALB/c小鼠骨髓培养的细胞表面标志和细胞形态符合imDCs典型特征;Western blot结果显示IDO+-imDC组可见IDO蛋白表达;IDO+-imDC组细胞表面分子CD80、CD86、MHCⅡ表达率分别为(9.4±2.2)%、(8.7±1.1)%、(11.4±2.6)%,imDC组分别为(8.5±1.8)%、(7.5±1.6)%、(10.2±2.1)%,两组比较无显著差异(P均> 0.05),IDO+-imDC组在体外刺激T淋巴细胞增殖的能力明显低于imDC组 (678±90.3 vs 1 199±275.5,P＜0.01) .结论:脂质体介导的IDO基因转染imDCs能维持细胞于未成熟状态,在MLR中,对T细胞增殖有明显的抑制作用.