白芍总苷调控Nrf-2/HO-1信号通路对支气管哮喘小鼠气道重塑的影响

摘要

目的:探究白芍总苷(TGP)对支气管哮喘模型小鼠气道重塑的影响及潜在机制。方法:将50只小鼠随机分为对照组(Control组)、模型组(OVA组)、TGP低剂量组(TGP-L,460 mg/kg)、TGP高剂量组(TGP-H,920 mg/kg)、TGP+ML385组(TGP 920 mg/kg+ML385 30 mg/kg),每组10只。采用卵清白蛋白(OVA)致敏和激发两个阶段建立哮喘小鼠模型。在每次激发前1 h,TGP各剂量组灌胃相应剂量的TGP混悬液,TGP+ML385组给予30 mg/kg的ML385和920 mg/kg的TGP灌胃,连续给药8周,实验过程中观察各组小鼠的行为学变化,最后一次激发24 h后收集支气管肺泡灌洗液(BALF),ELISA检测BALF中TGF-β1、半胱氨酰白三烯1(CysLT1)、半胱氨酰白三烯受体1(CysLTR1)水平;检测肺匀浆中总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性;HE和AB-PAS染色观察肺组织病理学变化;RT-qPCR检测肺组织TGF-β1、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)的mRNA表达;Western blot检测肺组织TGF-β1/Nrf-2/HO-1通路相关蛋白表达。结果:与Control组相比,OVA组小鼠出现典型的哮喘症状,如打喷嚏、烦躁不安、喘息,BALF中TGF-β1、CysLT1、CysLTR1水平、肺组织炎症和黏液分泌评分、TGF-β1 mRNA和蛋白、MMP-9 mRNA表达显著升高(P0.05);与OVA组相比,TGP-L组和TGP-H组小鼠的哮喘症状明显减轻,BALF中TGF-β1、CysLT1、CysLTR1水平、肺组织炎症和黏液分泌评分、TGF-β1 mRNA和蛋白、MMP-9 mRNA表达显著降低(P<0.05),肺组织中T-AOC、SOD、GSH-Px、CAT活性、TIMP-1 mRNA表达、Nrf-2和HO-1蛋白表达显著升高(P<0.05);且使用Nrf2抑制剂ML385阻断Nrf-2/HO-1通路激活可明显减弱TGP对哮喘小鼠肺组织氧化应激和气道重塑的抑制作用。结论:TGP可调节氧化应激和炎症诱发的支气管哮喘小鼠的气道重塑,其作用机制可能与降低TGF-β1表达、激活Nrf-2/HO-1通路有关。