桔贝合剂HPLC指纹图谱及5个有效成分含量测定研究

摘要

目的:通过高效液相色谱（HPLC）法建立桔贝合剂指纹图谱及其5个有效成分含量测定方法，并进行聚类分析和主成分分析，为桔贝合剂质量评价提供参考。方法:采用Phenomenex C18色谱柱（250 mm×4.6 mm, 4μm）,以甲醇-0.1%磷酸为流动相梯度洗脱，不同时段采用326,272,252 nm为检测波长。利用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》（2012版）生成桔贝合剂对照指纹图谱，同时测定5个有效成分的含量。并采用SPSS 21.0软件对19批次桔贝合剂进行聚类分析（CA）与主成分分析（PCA）。结果:建立了桔贝合剂HPLC指纹图谱，确定了15个共有峰，指认了其中8个色谱峰；19批桔贝合剂相似度为0.762～0.999,表明样品间差异较大。19批桔贝合剂可以聚为两大类，S1、S2、S3、S13、S14、S15、S16、S17、S18、S19聚为一类，S4、S5、S6、S7、S8、S9、 S10、S11、S12聚为一类。经主成分分析，主成分1、2是影响桔贝合剂质量评价的主要成分，2个主成分累方差贡献率为92.85%。黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、甘草酸铵5个成分进样量在一定范围内线性关系良好，平均加样回收率（n=6）为97.3%～101.0%,RSD均≤1.2%。结论:所建立的桔贝合剂HPLC指纹图谱及5个有效成分含量测定方法稳定可靠，与聚类分析和主成分分析结果，可为桔贝合剂的质量评价和进一步开发利用提供参考。