miRNA-21靶向调控Wnt/β-catenin对非小细胞肺癌细胞增殖与侵袭的影响

摘要

目的 研究microRNA-21(miR-21)是否通过调控wnt/β-catenin信号通路从而影响人非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞株NCI-H1975细胞体外增殖与侵袭能力.方法 预测和构建含有miR-21候选靶基因和 β-连环蛋白基因的双荧光素酶报告质粒.将miR-21模拟物通过Lipofactamine 2000脂质体转染法转染NCI-H1975细胞,应用qRT-PCR检测细胞中miR-21和 β-catenin mRNA表达情况,应用Western blot检测 β-catenin蛋白水平,CCK-8法检测miR-21 mimic对NCI-H1975细胞增殖能力的影响,Transwell侵袭实验检测miR-21 mimic对NCI-H1975细胞侵袭能力的影响.结果 qRT-PCR肺癌组织中的miR-21与邻近正常组织相比表达明显升高;双荧光素酶报告基因结果显示miR-21能和 β-catenin的3'UTR端结合且显著促进荧光素酶活性;上调miR-21可使 β-catenin的mRNA和蛋白表达水平显著升高,同时上调miR-21可显著增强NCI-H1975细胞的增殖与侵袭能力.结论 miR-21在转录后水平调控 β-catenin表达来促进NCI-H1975细胞的增殖与侵袭能力,可能是NSCLC潜在的治疗靶点.