树突状细胞负载甲胎蛋白、细胞毒性T细胞表位肽后的免疫应答

摘要

目的用负载hAFP 218-226位LLNQHACAV九肽的树突状细胞(dendritic cells,DC)诱导自身淋巴细胞,使之活化为肝细胞癌(HCC)特异性细胞毒性T细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL),并特异性杀伤HCC细胞.方法在体外用GM-CSF和IL-4诱导HLA-A2+健康志愿者外周血单核细胞,使其分化为高纯度DC.用负载hAFP 218-226位LLNQHACAV九肽的DC诱导自身淋巴细胞,使之成为HCC特异性CTL.结果诱导的DC分泌较高水平的IL-12(17.6-21.5 pg/m1),其中以第7天为最高(21.5 pg/m1),经DC和DC负载AFP表位肽后活化的淋巴细胞培养上清液中TNF水平均比在IL-2条件下培养的未活化淋巴细胞高,L929细胞死亡百分率分别为80 6%和11.6%;经DC和DC负载AFP表位肽后活化的淋巴细胞培养上清液中IL-12水平分别为20.5 pg/ml和46.9 pg/ml,经DC活化后淋巴细胞增殖指数大于3.活化后的淋巴细胞不但特异性杀伤HLA-A2+的HCC细胞HepG2和负载AFP表位肽的T2细胞,而且还不同程度杀伤HLA-A3+HCC细胞Alexander和其它表型HCC细胞,对NK细胞敏感的靶细胞慢性髓原白血病细胞K562也有较强的杀伤作用.结论负载hAFPHLA-A2限制性CTL九肽的DC对表达AFP HCC的研究和治疗有潜在的应用价值.