新生大鼠肝细胞脾内移植联合鼠肝再生增强因子治疗大鼠急性肝衰竭的疗效与免疫学机制

摘要

目的探讨新生大鼠肝细胞脾内移植联合重组鼠肝再生增强因子（rALR）治疗大鼠急性肝衰竭的疗效与免疫学机制。方法采用D-氨基半乳糖（1.2 g/kg）诱导并建立大鼠急性肝衰竭模型,36 h后随机分为6组:Ⅰ组:模型对照组;Ⅱ组:经脾脏注射等渗盐水1 ml,腹腔注射等渗盐水1 ml/d;Ⅲ组:经脾脏注射rALR 1 ml（50μg/kg）,腹腔注射rALR 1 ml（50μg·kg-1·d-1）;Ⅳ:经脾脏移植2×107同种异体新生大鼠肝细胞,腹腔注射等渗盐水1 ml/d;Ⅴ组:经脾脏移植2×107同种异体新生大鼠肝细胞,腹腔注射rALR 1 ml（50μg·kg-1·d-1）;Ⅵ组:经脾脏移植2×107同种异体新生大鼠肝细胞,腹腔注射环孢菌素1 ml（10 mg·kg-1·d-1）。观察大鼠每天存活率;术后第1、5天及2周处死大鼠以获取肝、脾组织,观察脾内移植肝细胞的组织学改变;在术前、术后第1、2、5、12天采集静脉血,采用放射免疫法测定血清IL-1β和TNFα的浓度。结果Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组大鼠存活时间差异无统计学意义,Ⅳ组有部分大鼠长期存活,2周存活率为33%,Ⅴ组大鼠2周存活率显著高于Ⅳ组,而与Ⅵ组大鼠2周存活率比较差异无统计学意义。Ⅳ、Ⅵ组脾内移植的肝细胞可存活5～7 d,Ⅴ组脾内移植肝细胞可存活至2周以上。术后第1天,Ⅳ组血清IL-1β水平显著高于Ⅴ组和Ⅵ组（P＜0.05）;术后第5天,Ⅳ组血清IL-1β水平仅与Ⅵ组差异有统计学意义（P＜0.05）。术后第1天,TNFα的浓度在Ⅱ组显著高于Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组（P＜0.05）。结论新生大鼠肝细胞脾内移植与rALR联合治疗大鼠急性肝衰竭有一定疗效,可提高D-氨基半乳糖诱导肝衰竭大鼠的存活率;移植肝细胞在脾脏可存活2周以上,其机制可能与促进肝细胞再生、预防移植肝细胞凋亡及轻微抑制细胞免疫有关。